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目录编号:
NRPB130
产品名称:
Ni-TED NUPharose Mag
Ni-TED NUPharose Mag是一款金属螯合亲和磁胶,主要用于快速筛选和纯化带组氨酸标签(His-tag)的蛋白。其配基为三羧甲基乙二胺(tris-carboxymethyl ethylene diamine,TED)基团,配位金属离子为Ni2+,NUPharose Mag基球是含顺磁性材料的琼脂糖凝胶微球。
与对应的琼脂糖柱层析填料(Ni-TED NUPharose FF,目录号为NRPB58)相比,本产品拥有相同的配基,且保持了亲和力(载量)和特异性(选择性)之间良好的均衡:对带组氨酸标签(His-tag)蛋白的结合量大于20 mg/mL的同时,一步纯化后样品纯度可达90%以上,在洗脱液中Ni2+含量与环境背景值一致,金属离子脱落率极低。
本产品的TED配基与Ni2+形成的五配位结构稳定性好,对螯合剂、还原剂、酸、碱等试剂有着出色的耐受性,可在10 mM EDTA、20 mM β-ME或20 mM DTT等条件下正常使用。Ni-TED NUPharose Mag适合用于下列纯化体系:
目标蛋白中含半胱氨酸或者对氧敏感,需要添加β-ME或DTT时;
目标蛋白中含半胱氨酸且有金属反应性,需要添加DTT和EDTA时;
目标蛋白容易被金属蛋白酶水解,需要添加EDTA时;
目标蛋白对高浓度咪唑敏感,需要降低洗脱液中咪唑浓度时;
真核细胞表达体系中本身含β-ME或EDTA 的情况;
对产物中金属离子含量要求严格时。
与琼脂糖填料的柱层析操作相比,除了保留Ni-TED配基对带Hig-tag蛋白亲和层析高纯度、高收率、高重现性等特点外,利用磁胶的纯化操作还有以下特点和优势:
料液一般无需澄清处理,可缩短纯化时间,对低表达量料液的富集效果更好;
可进行手动或者自动化的批量操作,手动操作不依赖于设备,操作通量高。
本产品不仅适用于带His-tag标签蛋白的小规模纯化与富集(例如百毫克级),更可以重复与放大使用。
产品特点与技术指标
产品名称 | Ni-TED NUPharose Mag |
目录编号 | NRPB130 |
基 质 | 顺磁性琼脂糖微球 |
配 基 | 三羧甲基乙二胺,螯合~25 μmol Ni2+/mL |
粒径范围a | 30~100 μm |
结合量b | ≥20 mg/mL带组氨酸标签蛋白 |
使用pH | 3~12(推荐的工作pH),3~12(长期稳定);2~14(短期稳定) |
化学稳定性 | 1)纯化缓冲液:常用的水相缓冲液,可含有10 mM EDTA,20 mM β-ME或20 mM DTT。 2)在位清洗(CIP)处理:1 M NaOH、1~2 M NaCl、70%乙醇、30%异丙醇,0.1~0.5%非离子型表面活性剂。 3)在下述溶液中处理特定时间,磁胶性能保持稳定:10 mM NaOH(长期)、0.1 M盐酸(24 h)、6 M盐酸胍(24 h)。 |
储存与运输 | 20%磁胶分散液,含20%乙醇,2~30 ℃保存与运输 |
保质期 | 5年 |
关键词:
Ni-TED NUPharose Mag
所属分类:
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