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NuPerley Ni-TED
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目录编号:

NRPB113

产品名称:

NuPerley Ni-TED


NuPerley Ni-TED是以三羧甲基乙二胺(tris-carboxymethyl ethylene diamine,TED)基团为配基的金属螯合填料,配位金属离子为Ni2+,金属离子脱落率极低。 本产品的TED配基与Ni2+形成的五配位结构稳定性好,对螯合剂、还原剂、酸、碱等试剂有着出色的耐受性,可在10 mM EDTA、100 mM β-ME或50 mM DTT等条件下正常使用,可在pH=1或pH=14的条件下处理24 h后保持出色的色谱性能,也长期保存在10 mM NaOH中。因此,NuPerley Ni-TED适合用于下列纯化体系:  目标蛋白中含半胱氨酸或者对氧敏感,需要添加β-ME或DTT时;  目标蛋白中含半胱氨酸且有金属反应性,需要添加DTT和EDTA时;  目标蛋白容易被金属蛋白酶水解,需要添加EDTA时;  目标蛋白对高浓度咪唑敏感,需要降低洗脱液中咪唑浓度时;  真核细胞表达体系中本身含β-ME或EDTA的情况;  对产物中金属离子含量要求严格时。 相较于Ni-TED NUPharose FF,NuPerley Ni-TED的配基修饰工艺经过了大幅改进,对带组氨酸标签蛋白的结合量≥40 mg/mL,更适合用于表达量大的发酵体系。

产品特点与技术指标

产品名称

NuPerley Ni-TED

目录编号

NRPB113L、NRPB113S(预装柱)

基   质

高刚性琼脂糖

配   基

三羧甲基乙二胺,螯合30 μmol Ni2+/mL。

粒径范围a

30~100 μm

平均粒径

~60 μm

动态结合载量b

40 mg/mL带组氨酸标签蛋白

推荐工作流速

60~300 cm/h

最大流速与压力c

900 cm/h,0.3 MPa

使用pH

3~12(推荐的工作pH),3~12(长期稳定);2~14(短期稳定)

化学稳定性

1)纯化缓冲液:常用的水相缓冲液,可含有10 mM EDTA,100 mM β-ME或50 mM DTT。

2)在位清洗(CIP)处理:1 M NaOH、1~2 M NaCl、70%乙醇、30%异丙醇,0.1~0.5%非离子型表面活性剂。

3)在下述溶液中处理特定时间,填料性能保持稳定:10 mM NaOH(长期)、0.1 M盐酸(24 h)、6 M盐酸胍(24 h)。

储存与运输

20%乙醇,2~30 ℃

保质期

5年