NRPB111

产品名称：

IMAC NUPharose HP

IMAC NUPharose HP是含次氮基三乙酸（NTA）基团的金属螯合填料，主要用于带组氨酸标签（His-tag）蛋白的亲和层析。NUPharose为v23威尼斯检测中心主頁生物开发的琼脂糖凝胶基础微球，HP为High Performance的缩写，意为高分辨，微球的平均粒径为~35 μm。IMAC NUPharose HP未螯合金属离子，用户可螯合Ni2+、Co2+、Cu2+、Zn2+等金属离子后使用，也提供螯合后可直接使用的填料及相应的预装柱，螯合Ni2+的产品为Ni-NTA NUPharose HP。通过配基修饰过程的优化，产品做到了亲和力和特异性的平衡：对带组氨酸标签蛋白的结合量大于50 mg/mL的同时，一步纯化后样品纯度可达90%以上。除了组氨酸，金属螯合填料也可与色氨酸、半胱氨酸残基形成配位结合，因而这款填料也可用于纯化不带标签但含这些氨基酸残基的蛋白，例如人脱铁转铁蛋白。与亚氨基二乙酸（IDA）配基相比，NTA配基的性能更加均衡，具有如下特点。  对螯合剂、还原剂、碱等试剂的耐受性更好。例如样品中含有1 mM EDTA、1~10 mM β-巯基乙醇或5 mM DTT时，可用Ni-NTA NUPharose FF正常纯化，纯化后可用0.1~1 M NaOH清洗。  纯化过程洗脱液中脱落的金属离子可低至ppb（10-12）级，脱落的金属离子相对于目标蛋白的摩尔比可低于0.1。

产品特点与技术指标

产品名称	IMAC NUPharose HP	Ni-NTA NUPharose HP
目录编号	NRPB111L、NRPB111S（预装柱）	NRPB122L、NRPB122S（预装柱）
基质	6%高度交联琼脂糖
配基	次氮基三乙酸，可螯合~17 μmol Ni²⁺/ml	次氮基三乙酸，已螯合~17 μmol Ni²⁺/ml
粒径范围^a	20~50 μm
平均粒径	~35 μm
动态结合载量^b	≥50 mg/mL带组氨酸标签蛋白
推荐工作流速	60~150 cm/h
最大流速与压力^c	300 cm/h，0.5 MPa
pH稳定性	3~12（推荐的工作pH），3~12（长期稳定）；2~14（短期稳定）
化学稳定性	在以下溶液中稳定：常用的水相缓冲液、1 mol/L氢氧化钠、8 mol/L尿素、6 mol/L盐酸胍、70%乙醇等。常见的还原剂、螯合剂、去污剂、变性剂等对填料的影响见下表。
储存与运输	20%乙醇，2~30 ℃
保质期	5年